【流式抗体】IMMUNOSTEP发现生物学

我们该怎样帮助你？

 发现生物学

蛋白质微阵列

利用其高密度蛋白质微阵列技术，Immunostep为其客户提供了鉴定生物标记物，酶底物鉴定，抗体特异性概况，自动抗体测试，药理学靶标和蛋白质 - 蛋白质相互作用研究的高性能工具。对于蛋白质微阵列的定制开发，该组织拥有一个cDNA文库或基因文库，拥有10,000多个不同人类蛋白质的克隆，其中应注意*过500个激酶克隆的存在，这是人类Kinome的完整代表。这意味着我们可以从cDNA文库的表达中提供个性化的高密度蛋白质微阵列制造工艺，包括数百种或数千种不同的人类蛋白质，包括激酶，磷酸酶，核受体和与G蛋白偶联的受体等等。根据客户的要求，将这些蛋白质固定在多个复制品上，使用之前功能化的载玻片作为固体基质。

图1：不同的微阵列格式A）抗体B）标记的蛋白C）蛋白质和通过利用Cy3调节扫描的蛋白质的阵列检测测定。

蛋白质微阵列技术使我们能够在非常短的时间内（通常为**的测定）以简单的方式获得结果，样品量非常少，大规模或高产量。

定制开发蛋白质微阵列的流程图：

图2：用于制备印版的机器人平台，蛋白质阵列的孵化和揭示（EVO 150，Tecan - Immunostep设施）。

以阵列格式大规模筛选噬菌体展示

设计和生成抗体中的新兴技术需要改进的方法来检测，鉴定和验证。更具体地说，考虑到单链可变片段（scFv）的小的以及它们穿透组织的能力，“噬菌体展示”技术构成针对某些类型的抗原产生特异性抗体的有力工具。

图3：使用ELISA和微阵列测定法构建，选择和分析噬菌体展示文库的总体概述。库（1）构建完成后，通过洗涤循环，洗脱和扩增（2）进行选择。ELISA和微阵列技术已被用于分析选定的抗特异性抗原的噬菌体（3）。

流式细胞术 - 从研究到**分析

流式细胞术是用于分析悬浮液中的颗粒和/或细胞的技术。它允许以每秒数千个细胞的速度对物理和化学特性进行多参数和同时分析。流式细胞仪应用非常多样化，从基础到**研究的范围很广。

在Immunostep，我们提供了一系列优化的细胞检测方法，使我们能够快速经济地获得结果，从而促进我们客户的研究。

 图7荧光分离细胞分析仪（FACSAria II-Immunostep设备）

从我们的细胞分析服务中，我们想指出以下几点：

• 体外药物筛选
  
  
  

  允许评估药物诱导的毒性和细胞凋亡途径，以及筛选数百种药物，使我们能够确定针对每种病理或患者的*佳治疗或可用药物的组合。

• 细胞免疫分型
  
  
  

  利用单克隆抗体小组，我们可以评估膜和细胞质抗原的表达，从而可以对不同细胞群进行表征和分类。

• 功能分析
  
  
  

  （吞噬作用/氧化爆发）：通过测量单核细胞和粒细胞吞噬作用的总体百分比以及每种细胞的单独吞噬活性，它使我们能够确定全血中白细胞（嗜中性粒细胞和单核细胞）的吞噬功能。此外，它还使我们能够定量确定破坏产生吞噬溶酶体的吞噬微生物的呼吸或氧化爆发。
  

  图5纳米材料生物表征中的吞噬作用和毒性分析

• 激活，增殖和细胞死亡
  
  
  

  它允许分析诸如IL-2R，L-选择蛋白，CD69和TNF-α等活化标记物。指出血小板活化（P-选择素）或嗜碱性粒细胞（mCD63）作为对1型*敏反应的反应的研究是有趣的。
  

  图6用CD123 + / CD203c + / HLA-DR选择的溶解的正常全血样品的直方图检测嗜碱性粒细胞群体与CD63 +活化嗜碱性粒细胞群体的关系。

• 基于树突细胞（DC）的测定
  
  
  

  提供细胞水平上蛋白质抗原性的体外比较。该测定基于通过DC的蛋白质或抗原呈递，其促进确定各种候选蛋白质的相对抗原性，从而允许直接比较。供体PBMC作为单核细胞的来源用于分析中，培养这些单核细胞以产生未成熟的DC。通过确定的培养基中的培养物，DC负责感兴趣的抗原以后来诱导表型成熟。使用获得单核细胞的相同样品的供体的PBMC通过磁分离消除CD8 + T细胞。之后，用CFSE标记消耗CD8 + T细胞的PBMC以进行细胞分裂的分析和监测。随后将用CFSE标记的PBMC样品与带有抗原的DC一起培养七天。*后，通过流式细胞术评估培养物。评估也将包括抗原控制，使用那些众所周知的抗原性高的抗原。

我们该怎样帮助你？

Immunostep的服务团队在蛋白质阵列的开发和利用以及流式细胞术被用作平台的定制化验的开发方面具有长期而宝贵的经验。两者都是强大的工具，在研究和**实践中有许多可能的应用。以下是我们进行的一些服务的示例：