原代抗精白常规及传代
原代抗精白<1>细胞
①细胞请于细胞箱中，大部分细胞是37℃，5% CO2，湿度100%下的。有极少部分细胞条件不一致，请仔细阅读相应的细胞说明书，使用正确的基及条件。
Cord blood, which contains powerful stem cells, comes from a newborn’s umbilical cord and is collected immediately after birth. Once the umbilical cord has been clamped and cut, the remaining blood in the umbilical cord is drawn into a collection bag.
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②细胞于瓶或皿中，加入适量说明书上标注的细胞相应完全基（一般液面高度2-3mm即可）。
sxbio1143TK细胞 人胸腺激酶缺陷性细胞 系<2>细胞传代（以下步骤适用于10cm皿）
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①细胞至密度达80%以上时即可传代，先将细胞基取出3mL用15mL离心管装好，其他基全部吸干舍弃；
②皿加入2-3mL无菌PBS，轻轻晃动皿，使PBS浸洗到皿底所有部位，PBS吸干舍弃；
③加入1mL胰酶，轻轻晃动皿，使胰酶浸没到皿底所有部位，将皿盖好放入箱中消化；
④3min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞不再贴壁，即可加入步收集的基混匀；若细胞还是贴壁，放回箱继续消化至不贴壁为止；
⑤将细胞悬液均匀分成几份，分别加入不同皿中，补加新基后放回箱。
细胞系，初代物开始次传代后的细胞,即称之为细胞系。如细胞系的生存期有限,则称之为有限细胞系（Finite Cell Line）；已获无限繁殖能力能生存的细胞系，称连续细胞系或无限细胞系（Infinite Cell Line）。无限细胞系大多已发生异倍化，具异倍体核型,有的可能已成为恶性细胞，因此本质上已是发生转化的细胞系。无限细胞系有的只有永生性（或不死性），但仍保留和无异体接种致癌性；有的不仅有永生性，异体接种也有致瘤性,说明已恶性化。这两种不同性质的无限细胞系，在国内外文献中对这些名词的应用上也常不十分严格.为概念上的明确，对有恶性的无限细胞系采用“恶性转化细胞系”一词表示可能更妥。而对那些只具永生性而无恶性的细胞系，则用无限细胞系或转化细胞系即可。当前流传的NIH3T3、Rat-1、10T1/2等均属这类细胞系。由某一细胞系分离出来的、在性状上与原细胞系不同的细胞系,称该细胞系的亚系（Subline）。
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sxbio1143TK细胞 人胸腺激酶缺陷性细胞 系<3>相关问题
①部分细胞在传代后时，会有以下现象：细胞内会有黑色小点、细胞间隙有些颗粒物、基漂浮一些死细胞或者细胞长的极慢。出现以上现象时，可以本公司技术人员此现象是否正常及相关处理，不要换液，大多数细胞1周换液2-3次即可。
②细胞碎片较多、背景较脏时，贴壁细胞用PBS漂洗两次、悬浮细胞打散后低速离心（900rpm，3min）能有效。
③传代比例建议1:2-1:3，长得比较快的细胞可以1：3，比较慢的按1:2传代。传代后，建议不要使用传代前所使用的基，会有大量细胞碎片甚至细胞死亡的风险。
④细胞状态不好或者生长极慢的时候，可以通过浓度细胞状态及生长速度。
⑤请不要随意更换基，因实验需要，可以逐步驯化。
德国微生物菌种保藏中心(DZ)成立于1969年，德国微生物菌种保藏中心(DZ)是德国的菌种保藏中心。该中心一直致力于、、质粒、素、人体和动物细胞、植物等的分类、鉴定和保藏工作。该中心是欧洲规模*大的生物资源中心，保藏有9400株，2400株，酵母500株，质粒300株，动物细胞500株，植物细胞500株，植物600株，90株等。该中心保藏的菌种可出售。另外，该中心还提供菌种的分离、鉴定保藏服务。
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⑥使用进口或者活力较强胰酶的客户请注意，消化或者吹打过于会细胞受损，从而细胞不贴壁或者死亡产生碎片，进而生长。应注意不要消化过长时间，建议1分钟以内（约30-40s），终止也要彻底，至少6倍胰酶体积的完全基终止，终止之后离心去除胰酶后再用新的基重悬后传代。
理化学研究所RIKEN（RIkagaku KENkyusho/Institute of Physical and Chemical Research）简称理研，属于文部科学省。是资本之父涩泽荣一于1917年设立的大型自然科学研究机构。二战期间曾为核研究的研究机构。
