凋亡相关因子ELISA试剂盒说明书常规及传代
凋亡相关因子ELISA试剂盒说明书<1>细胞
①细胞请于细胞箱中，大部分细胞是37℃，5% CO2，湿度100%下的。有极少部分细胞条件不一致，请仔细阅读相应的细胞说明书，使用正确的基及条件。
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②细胞于瓶或皿中，加入适量说明书上标注的细胞相应完全基（一般液面高度2-3mm即可）。
sxbio1143TK细胞 人胸腺激酶缺陷性细胞 系<2>细胞传代（以下步骤适用于10cm皿）
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①细胞至密度达80%以上时即可传代，先将细胞基取出3mL用15mL离心管装好，其他基全部吸干舍弃；
②皿加入2-3mL无菌PBS，轻轻晃动皿，使PBS浸洗到皿底所有部位，PBS吸干舍弃；
③加入1mL胰酶，轻轻晃动皿，使胰酶浸没到皿底所有部位，将皿盖好放入箱中消化；
④3min后，显微镜下观察细胞，若大部分细胞不再贴壁，即可加入步收集的基混匀；若细胞还是贴壁，放回箱继续消化至不贴壁为止；
⑤将细胞悬液均匀分成几份，分别加入不同皿中，补加新基后放回箱。
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sxbio1143TK细胞 人胸腺激酶缺陷性细胞 系<3>相关问题
①部分细胞在传代后时，会有以下现象：细胞内会有黑色小点、细胞间隙有些颗粒物、基漂浮一些死细胞或者细胞长的极慢。出现以上现象时，可以本公司技术人员此现象是否正常及相关处理，不要换液，大多数细胞1周换液2-3次即可。
②细胞碎片较多、背景较脏时，贴壁细胞用PBS漂洗两次、悬浮细胞打散后低速离心（900rpm，3min）能有效。
③传代比例建议1:2-1:3，长得比较快的细胞可以1：3，比较慢的按1:2传代。传代后，建议不要使用传代前所使用的基，会有大量细胞碎片甚至细胞死亡的风险。
④细胞状态不好或者生长极慢的时候，可以通过浓度细胞状态及生长速度。
⑤请不要随意更换基，因实验需要，可以逐步驯化。
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⑥使用进口或者活力较强胰酶的客户请注意，消化或者吹打过于会细胞受损，从而细胞不贴壁或者死亡产生碎片，进而生长。应注意不要消化过长时间，建议1分钟以内（约30-40s），终止也要彻底，至少6倍胰酶体积的完全基终止，终止之后离心去除胰酶后再用新的基重悬后传代。
