描述

内在小鼠 ERFETM的ELISA 是一种检测试剂盒，设计用于定量血清中的小鼠赤铁酮。该试剂盒不含巯基乙醇、叠氮化物或汞基防腐剂。

小鼠赤藓铁酮的检测基于双抗体夹心ELISA方法。96孔微孔板测定板预涂有抗小鼠红铁酮多克隆抗体。将小鼠血清样品、标准品或对照液与缓冲液混合并在测定板中孵育。样品中存在的小鼠红藓铁酮与测定板上的固定化抗体结合。然后洗涤板以去除未结合的小鼠红铁酮。加入与生物素偶联的第//二种抗小鼠红铁酮抗体，然后加入HRP-SA偶联物，HRP-SA偶联物与生物素化的抗小鼠赤红铁酮结合。光密度 （OD） 是通过添加 TMB 来测量的，反应产生蓝色，并且随着终止溶液的加入而停止显影。在酶标仪上以 450nm 处读取 OD，并通过绘制标准曲线的对数浓度与其相应的 OD 来制备标准曲线。颜色的强度与样品中 ERFE 的浓度成正比。总检测运行时间不到 3 小时。

注意：

根据我们的研究，健康小鼠（C57BL / 6）的血清ERFE浓度基本上无法检测到（低于检测限）。在红细胞生成无效（β-地中海贫血）的小鼠模型中，血清ERFE浓度范围为1-2 ng / ml。

标准曲线：

每次运行采用包含零点的八点标准曲线。下图所示为典型标准曲线示例（注意：实际计算请勿直接使用该示例曲线）。