●误差的来源:● 一个客观存在的具有一定数值的被测成分的物理量,称为真实值,测定值与真实值之差称为误差。根据产生误差的原因,通常分为两类,即系统误差和偶然误差。 系统误差是由固定原因造成的误差,在测定的过程中按一定规律重复出现,有一定的方同性,即测定值总是偏高或总是偏低,这种误差的大小是可测的,所以又称“可测误差”。它来源于分析方法误差、仪器误差、试剂误差和主观误差,如分析人员掌握操作规程与操作条件等因素。 偶然误差是由于一些偶然的外因所引起的误差,产生的原因往往是不固定的、未知的,且大小不一、或正或负,其大小是不可测的,这类误差的来源往往一时难于觉察,可能是由于环境(气压、温度、湿度)等的偶然波动或仪器的性能、分析人员对各份试样处理时不一致所产生的。
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●使用 RIPA 提取的总蛋白总结●: 1. 并非是真正意义上的总蛋白,相当一部分蛋白丢失在弃去的不可溶组分中。 2. 很多常用的内参,如 Actin,tubulin,LaminA,H3 等均在 RIPA 不可溶组分中被丢失。 3. 目标蛋白可能会在 RIPA 不可溶组分中被丢失,也可能不被丢失,具有不可预见性,非选择性。 4. 同种蛋白在不同样品中丢失的情况并不相同,蛋白丢失并不成比例。 5. 利用目的蛋白和内参比值做校正会出现偏差,不适合 WB 目的蛋白的半定量分析。
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编辑:小檀20181227
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