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人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)试剂盒

人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)试剂盒操作注意事项

● 试剂盒操作步骤如下: ● 1.用TBS或PBS制备蛋白样品的稀释液。稀释度要取决于样品中存在的抗原浓度。由于抗原浓度通常未知,因此有必要检测宽范围的稀释度。 2.制备硝酸纤维素膜,用铅笔标上每个待测一抗/二抗的浓度。所需转印膜的数量取决于待筛查的一抗和/或二抗有多少种不同的稀释浓度。通常来说,一抗要检测一到两个稀释度,而二抗要检测两到三个稀释度。 3.将硝酸纤维素膜放在滤纸上,将抗原稀释液点在膜上。每个点的体积越少越好(1-5μl),以保证点尽可能地小。如果需要使用5μl以上的样品,在点完一次后,干燥2-5分钟,再点一次。让膜干燥10-15分钟,或直至无可见水分。 4.用封闭液封闭膜上的非特异性位点,室温震荡孵育1h。 5.用包含1/10体积封闭液的洗涤液稀释一抗,并加到膜上,室温震荡孵育1h。 6.用洗涤液洗膜4次,每次5分钟,用尽可能大体积的洗脱液。 7.用包含1/10体积封闭液的洗涤液稀释二抗,并加到膜上,室温震荡孵育1h。 8.用洗涤液洗膜4次,每次5分钟,用尽可能大体积的洗脱液。 9.准备底物工作液。白介素1ELISA试剂盒厂家制备足够体积的工作液,以确保印迹点完全湿润,且印迹点在孵育过程中不会干。 10.将膜放在底物工作液中孵育5分钟。 11.将膜取出,放在塑料布或其它防护膜上。 12.蛋白一侧朝上,将印迹贴到胶片上,曝光30-60秒。为获得*结果,曝光时间可能不同。如果*次曝光不够,再试试2-5分钟。 13.在一张优化好的印迹膜上,底物产生的信号可能会持续6-24小时,这取决于具体的产品。

目前中国**代理 促销
时间:2018.12.19-2019.1.19

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人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)试剂盒

人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)试剂盒(多种种属)实验科研认可品牌

人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)试剂盒,

● 试剂盒操作步骤如下: ● 1.用TBS或PBS制备蛋白样品的稀释液。稀释度要取决于样品中存在的抗原浓度。由于抗原浓度通常未知,因此有必要检测宽范围的稀释度。 2.制备硝酸纤维素膜,用铅笔标上每个待测一抗/二抗的浓度。所需转印膜的数量取决于待筛查的一抗和/或二抗有多少种不同的稀释浓度。通常来说,一抗要检测一到两个稀释度,而二抗要检测两到三个稀释度。 3.将硝酸纤维素膜放在滤纸上,将抗原稀释液点在膜上。每个点的体积越少越好(1-5μl),以保证点尽可能地小。如果需要使用5μl以上的样品,在点完一次后,干燥2-5分钟,再点一次。让膜干燥10-15分钟,或直至无可见水分。 4.用封闭液封闭膜上的非特异性位点,室温震荡孵育1h。 5.用包含1/10体积封闭液的洗涤液稀释一抗,并加到膜上,室温震荡孵育1h。 6.用洗涤液洗膜4次,每次5分钟,用尽可能大体积的洗脱液。 7.用包含1/10体积封闭液的洗涤液稀释二抗,并加到膜上,室温震荡孵育1h。 8.用洗涤液洗膜4次,每次5分钟,用尽可能大体积的洗脱液。 9.准备底物工作液。白介素1ELISA试剂盒厂家制备足够体积的工作液,以确保印迹点完全湿润,且印迹点在孵育过程中不会干。 10.将膜放在底物工作液中孵育5分钟。 11.将膜取出,放在塑料布或其它防护膜上。 12.蛋白一侧朝上,将印迹贴到胶片上,曝光30-60秒。为获得*结果,曝光时间可能不同。如果*次曝光不够,再试试2-5分钟。 13.在一张优化好的印迹膜上,底物产生的信号可能会持续6-24小时,这取决于具体的产品。

检测范围:欢迎QQ或电话索取原版说明书.
产品规格:96T/48T。
主要成分:酶标板,试剂,标准品
经营种类:进口分装和原装、国产
性状:盒装液体
试剂盒保存:2-8℃低温保存。
标本:血清、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
ELISA常用的方法:双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。
预期应用:ELISA法定量测定血清、、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。


人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)试剂盒

人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3(MAPKAPK3)试剂盒试剂盒(多种属)行业操作流程如下: (1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。  (2)酶标板置4℃,包被过夜。 (3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。 (4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF工作液50μl。  (5)酶标板置37℃箱的湿盒内,孵育60min。  (6)洗板,同(4)。  (7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔工作液 100μl。  (8)酶标板置37℃箱的湿盒内,孵育60min。  (9)洗板,同(4)。  (10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。  (11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。  (12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以由容器上的划痕或指印等造成的光。 (13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定。

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编辑:小檀20181219

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