ELISA应用:ELISA检测技术早在19世纪70,80年代就开发出来用于替代放射性同位素标记技术用于研究蛋白质间的相互作用(配体-受体,抗原-抗体),到如今已经接近50年的历史了。这个技术从科研的角度来说已经不具备**性,没有太多的价值,不值得专门进行研究,更多的是一个使用的工具。工业应用落后于基础研究,ELISA技术在制药领域的应用随着近20年生物制药领域的迅猛发展展现着越来越多的使用价值,当然ELISA的应用情况也越来越复杂,这样的复杂性也使得早期的基础研究并不再具有很好的指导意义,ELISA方法滥用错用往往导致实验结果出现系统性偏差,影响实验结果的真实性,做出错误的选择。本文的写作目的旨在作为文献之外关于ELISA实际应用的一个总结,反补基础研究的不足,使得该技术更具使用价值。
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人FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)试剂盒,
检测范围:欢迎QQ或电话索取原版说明书. 产品规格:96T/48T。 主要成分:酶标板,试剂,标准品等 经营种类:进口分装和原装、国产 性状:盒装液体 试剂盒保存:2-8℃低温保存。 标本:血清、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。 ELISA常用的方法:双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。 预期应用:ELISA法定量测定血清、、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。
人FMS样酪氨酸激酶3(Flt3)试剂盒试剂盒(多种属)行业操作流程如下: (1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。 (2)酶标板置4℃,包被过夜。 (3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。 (4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF工作液50μl。 (5)酶标板置37℃箱的湿盒内,孵育60min。 (6)洗板,同(4)。 (7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔工作液 100μl。 (8)酶标板置37℃箱的湿盒内,孵育60min。 (9)洗板,同(4)。 (10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。 (11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 (12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以由容器上的划痕或指印等造成的光。 (13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定。
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编辑:小檀20181217
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