引起 ELISA 测定结果与文献报导不一致的原因主要有三点,试剂因素、标本因素和操作因素。 试剂因素:1. 试剂应选择灵敏度高、特异性好、稳定性好、批间差小、操作方便的试剂。 2.不同厂家的试剂一定不能混用,包括底物和洗涤液。由于校准标准有差异,还有抗体、检测方法、试剂、交叉反应等因素都会导致对样本的检测结果不一致。如:有的厂家酶标板孔间 CV 值大于 20%,标记酶的活性及显色液的稳定性比较差,使用劣质的试剂必然导致结果的假阳性或假阴性。 3. 要注意试剂的批号和出厂日期,虽然试剂的有效期多为 1 年,好选择刚出厂的试剂盒。 4. 避免选择假的 ELISA 试剂盒。有些厂家为夸大生产 ELISA 的指标范围,用一种指标来冒充其它指标,造成各种种属、各种指标都可以做的假象。 标本因素和操作因素: 血清是常用的 ELISA 标本,血浆一般可视为与血清同等的标本,标本引起的假阳性和假阴性结果主要是干扰性物质所致,分为内源性物质和外源性物质两种。 内源性物质:有人认为大约 40%的人血清标本中含有非特异性干扰物质,可以不同程度影响检测结果。常见的干扰物质有:类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠 Ig (s) 抗体、交叉反应物质和其它物质等。 外源性物质:外源性物质常常是由于用于 ELISA 测定的血标本的采集、贮存等不当所致。如标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存过久、标本凝集不全和采血管中添加物等影响。
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检测范围:欢迎QQ或电话索取原版说明书. 产品规格:96T/48T。 主要成分:酶标板,试剂,标准品等 经营种类:进口分装和原装、国产 性状:盒装液体 试剂盒保存:2-8℃低温保存。 标本:血清、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。 ELISA常用的方法:双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。 预期应用:ELISA法定量测定血清、、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。
●使用 RIPA 提取的总蛋白总结●: 1. 并非是真正意义上的总蛋白,相当一部分蛋白丢失在弃去的不可溶组分中。 2. 很多常用的内参,如 Actin,tubulin,LaminA,H3 等均在 RIPA 不可溶组分中被丢失。 3. 目标蛋白可能会在 RIPA 不可溶组分中被丢失,也可能不被丢失,具有不可预见性,非选择性。 4. 同种蛋白在不同样品中丢失的情况并不相同,蛋白丢失并不成比例。 5. 利用目的蛋白和内参比值做校正会出现偏差,不适合 WB 目的蛋白的半定量分析。
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编辑:小檀20181119
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