引起 ELISA 测定结果与文献报导不一致的原因主要有三点，试剂因素、标本因素和操作因素。 试剂因素：1. 试剂应选择灵敏度高、特异性好、稳定性好、批间差小、操作方便的试剂。 2.不同厂家的试剂一定不能混用，包括底物和洗涤液。由于校准标准有差异，还有抗体、检测方法、试剂、交叉反应等因素都会导致对样本的检测结果不一致。如：有的厂家酶标板孔间 CV 值大于 20%，标记酶的活性及显色液的稳定性比较差，使用劣质的试剂必然导致结果的假阳性或假阴性。 3. 要注意试剂的批号和出厂日期，虽然试剂的有效期多为 1 年，好选择刚出厂的试剂盒。 4. 避免选择假的 ELISA 试剂盒。有些厂家为夸大生产 ELISA 的指标范围，用一种指标来冒充其它指标，造成各种种属、各种指标都可以做的假象。 标本因素和操作因素： 血清是常用的 ELISA 标本，血浆一般可视为与血清同等的标本，标本引起的假阳性和假阴性结果主要是干扰性物质所致，分为内源性物质和外源性物质两种。 内源性物质:有人认为大约 40%的人血清标本中含有非特异性干扰物质，可以不同程度影响检测结果。常见的干扰物质有：类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠 Ig (s) 抗体、交叉反应物质和其它物质等。 外源性物质:外源性物质常常是由于用于 ELISA 测定的血标本的采集、贮存等不当所致。如标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存过久、标本凝集不全和采血管中添加物等影响。
猪胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)ELISA Kit，
检测范围：欢迎QQ或电话索取原版说明书. 产品规格：96T/48T。 主要成分：酶标板,试剂,标准品等 经营种类：进口分装和原装、国产 性状：盒装液体 试剂盒保存：2-8℃低温保存。 标本：血清、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。 ELISA常用的方法：双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。 预期应用：ELISA法定量测定血清、、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。
猪胰岛素样生长因子结合蛋白(IGFBP)ELISA Kit试剂盒（多种属）行业操作流程如下： （1）待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 （2）酶标板置4℃，包被过夜。 （3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。 （4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF工作液50μl。 （5）酶标板置37℃箱的湿盒内，孵育60min。 （6）洗板，同（4）。 （7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔工作液 100μl。 （8）酶标板置37℃箱的湿盒内，孵育60min。 （9）洗板，同（4）。 （10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 （11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 （12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以由容器上的划痕或指印等造成的光。 （13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定。
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编辑：小檀20181115
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