小鼠卵巢癌标志物CA125ELISA Kit多种属一步法检测
● 试剂盒操作步骤如下: ●
1.用TBS或PBS制备蛋白样品的稀释液。稀释度要取决于样品中存在的抗原浓度。由于抗原浓度通常未知,因此有必要检测宽范围的稀释度。
2.制备硝酸纤维素膜,用铅笔标上每个待测一抗/二抗的浓度。所需转印膜的数量取决于待筛查的一抗和/或二抗有多少种不同的稀释浓度。通常来说,一抗要检测一到两个稀释度,而二抗要检测两到三个稀释度。
3.将硝酸纤维素膜放在滤纸上,将抗原稀释液点在膜上。每个点的体积越少越好(1-5μl),以保证点尽可能地小。如果需要使用5μl以上的样品,在点完一次后,干燥2-5分钟,再点一次。让膜干燥10-15分钟,或直至无可见水分。
4.用封闭液封闭膜上的非特异性位点,室温震荡孵育1h。
5.用包含1/10体积封闭液的洗涤液稀释一抗,并加到膜上,室温震荡孵育1h。
6.用洗涤液洗膜4次,每次5分钟,用尽可能大体积的洗脱液。
7.用包含1/10体积封闭液的洗涤液稀释二抗,并加到膜上,室温震荡孵育1h。
8.用洗涤液洗膜4次,每次5分钟,用尽可能大体积的洗脱液。
9.准备底物工作液。白介素1ELISA试剂盒厂家制备足够体积的工作液,以确保印迹点完全湿润,且印迹点在孵育过程中不会干。
10.将膜放在底物工作液中孵育5分钟。
11.将膜取出,放在塑料布或其它防护膜上。
12.蛋白一侧朝上,将印迹贴到胶片上,曝光30-60秒。为获得*结果,曝光时间可能不同。如果*次曝光不够,再试试2-5分钟。
13.在一张优化好的印迹膜上,底物产生的信号可能会持续6-24小时,这取决于具体的产品。
检测种属:人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。标本:血清、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
(多种种属)实验科研认可品牌
小鼠卵巢癌标志物CA125ELISA Kit,
● 试剂盒操作步骤如下: ●
1.用TBS或PBS制备蛋白样品的稀释液。稀释度要取决于样品中存在的抗原浓度。由于抗原浓度通常未知,因此有必要检测宽范围的稀释度。
2.制备硝酸纤维素膜,用铅笔标上每个待测一抗/二抗的浓度。所需转印膜的数量取决于待筛查的一抗和/或二抗有多少种不同的稀释浓度。通常来说,一抗要检测一到两个稀释度,而二抗要检测两到三个稀释度。
3.将硝酸纤维素膜放在滤纸上,将抗原稀释液点在膜上。每个点的体积越少越好(1-5μl),以保证点尽可能地小。如果需要使用5μl以上的样品,在点完一次后,干燥2-5分钟,再点一次。让膜干燥10-15分钟,或直至无可见水分。
4.用封闭液封闭膜上的非特异性位点,室温震荡孵育1h。
5.用包含1/10体积封闭液的洗涤液稀释一抗,并加到膜上,室温震荡孵育1h。
6.用洗涤液洗膜4次,每次5分钟,用尽可能大体积的洗脱液。
7.用包含1/10体积封闭液的洗涤液稀释二抗,并加到膜上,室温震荡孵育1h。
8.用洗涤液洗膜4次,每次5分钟,用尽可能大体积的洗脱液。
9.准备底物工作液。白介素1ELISA试剂盒厂家制备足够体积的工作液,以确保印迹点完全湿润,且印迹点在孵育过程中不会干。
10.将膜放在底物工作液中孵育5分钟。
11.将膜取出,放在塑料布或其它防护膜上。
12.蛋白一侧朝上,将印迹贴到胶片上,曝光30-60秒。为获得*结果,曝光时间可能不同。如果*次曝光不够,再试试2-5分钟。
13.在一张优化好的印迹膜上,底物产生的信号可能会持续6-24小时,这取决于具体的产品。
检测范围:欢迎QQ或电话索取原版说明书.
产品规格:96T/48T。
主要成分:酶标板,试剂,标准品等
经营种类:进口分装和原装、国产
性状:盒装液体
试剂盒保存:2-8℃低温保存。
标本:血清、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
ELISA常用的方法:双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。
预期应用:ELISA法定量测定血清、、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。
●控制和消除误差的方法:●
误差的大小,直接关系到分析结果的精密度和准确度。减少误差的措施有如下几种:
1、正确选取样品量
样品量的多少与分析结果的准确度关系很大。在常量分析中,滴定量或重量过多或过少都直接影响准确度。在比色分析中,含量与吸光度之间往往只在一定范围内呈线性关系。这就要求测定时读数在此范围内,以提高准确度。通过增减取样量或改变稀释倍数可以达到此目的。
2、增加平行测定次数
减少偶然误差测定次数越多,则平均值就越接近真实值,偶然误差亦可抵消,所以分析结果就越可靠。一般要求每个样品的测定次数不应少于两次,如要更**的测定,分析次数应更多些。
3、对照试验
对照试验是检查系统误差的有效方法。在进行对照试验时,常常用已知结果的试样与被测试样一起按完全相同的步骤操作,或由不同单位、不同人员进行测定,后将结果进行比较。这样可以抵消许多不明了因素引起的误差。
4、空白试验
在进行样品测定过程的同时,采用完全相同的操作方法和试剂,惟独不加被测定的物质,进行空白试验。在测定值中扣除空白值,就可以抵消由于试剂中的杂质干扰等因素造成的系统误差。
5、校正仪器和标定溶液
各种计量测试仪器,如实验室电子天平、旋光仪、分光光度计,以及移液管、滴定管、容量瓶等,在**的分析中必须进行校准,并在计算时采用较正值。各种标准溶液(尤其是容易变化的试剂)应按规定定期标定,以保证标准溶液的浓度和质量。
6、严格遵守操作规程
分析方法所规定的技术条件要严格遵守。经国家或主管部门规定的分析方法,在未经有关部门同意下,不应随意改动。
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编辑:小檀20181109