ELISA方法可以分为两类。**类:生物大分子的定量,**类:亲和力测定评价或者筛选。抗体的稳转、瞬和发酵过程的表达量监控,细胞因子的监控,体内抗体药物的药代动力学,药效生物标志物的含量检测和免疫原性测定等可划分为**类使用目的,杂交瘤的滴度测定,噬菌体展示的淘选筛选,体外抗体和对应靶点蛋白或细胞表面受体的亲和力评价可划分为**类使用目的。使用目的不一样,即使使用同样的试剂材料,也会有不同实验模式和拟合曲线。下面小编将以某抗体的定量的方法开发(**类目的)和亲和力检测方法开发(**类目的)为例,对不同使用目的开发策略进行介绍。
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检测范围:欢迎QQ或电话索取原版说明书. 产品规格:96T/48T。 主要成分:酶标板,试剂,标准品等 经营种类:进口分装和原装、国产 性状:盒装液体 试剂盒保存:2-8℃低温保存。 标本:血清、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。 ELISA常用的方法:双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。 预期应用:ELISA法定量测定血清、、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。
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人尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)ELISA Kit试剂盒(多种属)行业操作流程如下: (1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。 (2)酶标板置4℃,包被过夜。 (3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。 (4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF工作液50μl。 (5)酶标板置37℃箱的湿盒内,孵育60min。 (6)洗板,同(4)。 (7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔工作液 100μl。 (8)酶标板置37℃箱的湿盒内,孵育60min。 (9)洗板,同(4)。 (10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。 (11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 (12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以由容器上的划痕或指印等造成的光。 (13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定。
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编辑:小檀20181026
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