鸡L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA Kit操作技巧

简述利用试剂盒法测定毒鼠强的原理并简述此方法检测固体样品的过程? ● 试剂盒法检测原理：毒鼠强可与二羟基萘二磺酸发生反应变为淡紫色，本方法检出限为1ug，低检出浓度为2ug/ml，浓度高时可变为深红色。 ● 检测固体样品过程：取2mL或2g样品放入比色管中，加入5mL乙酸乙酯，充分振摇，静置，取上清液2mL于试管中或表面皿上，在 85℃左右水浴中加热,待乙酸乙酯剩余1mL以下时,提高水浴温度挥干余液，放至室温后，加入1mL的纯净水充分溶解残渣，加入3滴毒鼠强显色剂，轻轻摇匀，加入 5mL毒鼠强试液，轻轻摇动后，将试管放入90℃以上水浴中，加热5min后取出，观察颜色变化。溶液颜色变为淡紫红色为毒鼠强阳性反应，随着毒鼠强浓度增加，紫色加深。

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鸡L苯丙氨酸解氨酶(PAL)ELISA Kit，

检测范围：欢迎QQ或电话索取原版说明书.
产品规格：96T/48T。
主要成分：酶标板,试剂,标准品等
经营种类：进口分装和原装、国产
性状：盒装液体
试剂盒保存：2-8℃低温保存。
标本：血清、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。
ELISA常用的方法：双抗体夹心法、间接法、竞争法以及BAS-ELISA等。
预期应用：ELISA法定量测定血清、、细胞培养上清或其它相关生物液体中的含量。

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引起 ELISA 测定结果与文献报导不一致的原因主要有三点，试剂因素、标本因素和操作因素。 试剂因素：1. 试剂应选择灵敏度高、特异性好、稳定性好、批间差小、操作方便的试剂。 2.不同厂家的试剂一定不能混用，包括底物和洗涤液。由于校准标准有差异，还有抗体、检测方法、试剂、交叉反应等因素都会导致对样本的检测结果不一致。如：有的厂家酶标板孔间 CV 值大于 20%，标记酶的活性及显色液的稳定性比较差，使用劣质的试剂必然导致结果的假阳性或假阴性。 3. 要注意试剂的批号和出厂日期，虽然试剂的有效期多为 1 年，好选择刚出厂的试剂盒。 4. 避免选择假的 ELISA 试剂盒。有些厂家为夸大生产 ELISA 的指标范围，用一种指标来冒充其它指标，造成各种种属、各种指标都可以做的假象。 标本因素和操作因素： 血清是常用的 ELISA 标本，血浆一般可视为与血清同等的标本，标本引起的假阳性和假阴性结果主要是干扰性物质所致，分为内源性物质和外源性物质两种。 内源性物质:有人认为大约 40%的人血清标本中含有非特异性干扰物质，可以不同程度影响检测结果。常见的干扰物质有：类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠 Ig (s) 抗体、交叉反应物质和其它物质等。 外源性物质:外源性物质常常是由于用于 ELISA 测定的血标本的采集、贮存等不当所致。如标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存过久、标本凝集不全和采血管中添加物等影响。

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编辑：小檀20181012