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大鼠血管紧张素??/生成素(Ang??)具体保存方法

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引起 ELISA 测定结果与文献报导不一致的原因主要有三点,试剂因素、标本因素和操作因素。 试剂因素:1. 试剂应选择灵敏度高、特异性好、稳定性好、批间差小、操作方便的试剂。 2.不同厂家的试剂一定不能混用,包括底物和洗涤液。由于校准标准有差异,还有抗体、检测方法、试剂、交叉反应等因素都会导致对样本的检测结果不一致。如:有的厂家酶标板孔间 CV 值大于 20%,标记酶的活性及显色液的稳定性比较差,使用劣质的试剂必然导致结果的假阳性或假阴性。 3. 要注意试剂的批号和出厂日期,虽然试剂的有效期多为 1 年,好选择刚出厂的试剂盒。 4. 避免选择假的 ELISA 试剂盒。有些厂家为夸大生产 ELISA 的指标范围,用一种指标来冒充其它指标,造成各种种属、各种指标都可以做的假象。 标本因素和操作因素: 血清是常用的 ELISA 标本,血浆一般可视为与血清同等的标本,标本引起的假阳性和假阴性结果主要是干扰性物质所致,分为内源性物质和外源性物质两种。 内源性物质:有人认为大约 40%的人血清标本中含有非特异性干扰物质,可以不同程度影响检测结果。常见的干扰物质有:类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠 Ig (s) 抗体、交叉反应物质和其它物质等。 外源性物质:外源性物质常常是由于用于 ELISA 测定的血标本的采集、贮存等不当所致。如标本溶血、标本被细菌污染、标本贮存过久、标本凝集不全和采血管中添加物等影响。

检测种属:人、大小鼠、兔、羊、猴、猪、豚鼠ELISA检测试剂盒等种属。标本:血清、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。

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神经营养因子-3ELISA试剂盒(多种种属)实验科研认可品牌

大鼠血管紧张素??/生成素(Ang??),本应用试剂盒已完成多中心临床验证,并通过国家食药监总局的认证。我司通过建立覆盖欧美的全球采购中心,与欧美1000多个品牌建立了正式的代理与合作,涵盖所有的生物试剂门类,特别是二三线高质量品牌产品,具有压倒性地优势。产品领域:分子生物学、细胞生物学、细菌学、遗传学、免疫学、生物化学、蛋白质学、细胞治疗、临床应用等领域。主营产品:流式抗体、ELISA试剂盒、标准品和对照品、生化试剂、抗体和抗原、细胞因子、技术服务、实验耗材和消耗品、仪器设备。

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大鼠血管紧张素??/生成素(Ang??)试剂盒(多种属)行业操作流程如下: (1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。  (2)酶标板置4℃,包被过夜。 (3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。 (4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF工作液50μl。  (5)酶标板置37℃箱的湿盒内,孵育60min。  (6)洗板,同(4)。  (7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔工作液 100μl。  (8)酶标板置37℃箱的湿盒内,孵育60min。  (9)洗板,同(4)。  (10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。  (11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。  (12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以由容器上的划痕或指印等造成的光。 (13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定。

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编辑:小檀20181010

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