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突破早期诊断大关,对疾病诊治的提升有着非同寻常的意义。

细胞凋亡发生时,内源性核酸内切酶将分解核小体区间的双链DNA,但核小体本身由于由组蛋白紧密结合而免受切割,单克隆抗体可以与核小体形成夹心结构,可通过检测核小体判断细胞是否经历凋亡事件。 原理:●细胞凋亡的发生,是由于钙-镁依赖性核酸酶进入核小体间切割DNA,产生180bp~200bp或其倍数的核小体片段。而核小体由于与组蛋白H2A、H2B、H3和H4形成紧密复合物而不被核酸内切酶切割。采用双抗体夹心酶免疫法,应用小鼠抗DNA和抗组蛋白的单克隆抗体,与核小体片段形成夹心结构,可特异性检测细胞溶解物中的核小体片段。

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酶联免疫吸附实验(ELISA)已经成为实验室常用的检测蛋白含量变化的实验技术,常用的检测方法是用抗原包被孔板,然后用一抗和二抗检测抗原的变化。这里使用两种抗体的原因一方面是信号放大的需要,另一方面是要减少成本。假如每种抗体都用酶或者荧光素标记的话,那将会需要多少种标记的抗体呢?而且可以肯定价格一定不菲。而用标记二抗的方法就可以大大减少需要标记抗体的数目,同时也能提高标记抗体的效用,这样就能用尽量少的标记抗体满足尽量多的实验要求。

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编辑:小檀20180905

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