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【流式抗体】IMMUNOSTEP多肽生产服务

流式抗体IMMUNOSTEP多肽生产服务
阿肽由一个化合物,无论是天然的或合成的,含有由羧基的氨基酸之一的和另一个氨基基团连接的两个或更多个氨基酸。

肽的化学合成已被用作研究和诊断目的的有效工具多年。过去,进行液相合成或“溶液相肽合成”。然而,反应的化学基础知识的进步导致使用固相“固相肽合成”合成肽。


蛋白质服务 多肽生产服务

阿肽由一个化合物,无论是天然的或合成的,含有由羧基的氨基酸之一的和另一个氨基基团连接的两个或更多个氨基酸。

肽的化学合成已被用作研究和诊断目的的有效工具多年。过去,进行液相合成或“溶液相肽合成”。然而,反应的化学基础知识的进步导致使用固相“固相肽合成”合成肽。

肽合成的一般方案如下(图1):

固相肽合成通用方案

图1:固相肽合成的一般方案
(摘自www.biotech.uiuc.edu)

 

固体支持物是一种合成聚合物,与-OH的试剂组相连。这些基团的设计使得它们可以容易地与在其羧基末端被保护的N-α-氨基酸的羧基反应; 它因此共价连接到聚合物上。可以去除胺基(X)的保护并且**个N-α-氨基酸将与锚定的氨基酸连接。重复描述的步骤直到获得期望的序列。当合成完成时,试剂从其与基质的连接释放羧基末端,将所需的肽留在溶液中。

用于肽合成的两种主要化学过程是Fmoc(图2)和t-Boc(图3 )。

每种方法需要不同的与链相连的氨基酸保护,因此需要不同的切割/去保护方法。每种方法需要不同的树脂。两个系统的主要区别如下:

 

的t-Boc-

将Fmoc

需要特殊装备

没有

试剂成本

肽的溶解度

更高

降低

疏水肽的纯度

可能会更低

聚合问题

不太经常

更频繁

合成时间

~20分钟/ aa

〜20-60分钟/ aa

*后的去保护

HF

TFA

**

潜在危险

相对**

正交

没有

肽设计

肽合成可能很简单,但在开始合成之前必须考虑一系列因素。氨基酸的组成和肽的长度可以影响氨基酸的正确组装,并且还可以进行后期的纯化。这些因素会影响*终产品的溶解度。在设计多肽时,应考虑以下几点,以便我们的客户获得理想的产品以满足他们的需求。在IMMUNOSTEP我们为客户提供我们宝贵的经验,使他们自己的设计成为现实。 

  • 氨基酸的组成。


    这不仅影响氨基酸的组装容易程度,而且影响溶解性,稳定性和后期纯化过程。大多数感兴趣的肽,例如那些用作抗原的肽,从N末端,C末端或天然蛋白质序列的内部进行。因此,这些肽并不总是理想的客户的研究目的。有些可能是不溶或不稳定的,有些可能会导致纯化问题,而在其他情况下,折叠可能与天然蛋白质的折叠不相似。由于我们多年来获得的经验,在IMMUNOSTEP,我们可以找到那些有问题的氨基酸并修改合成肽以改善合成肽的质量。根据客户的需求可以在生产过程中进行几种不同的修改,例如根据需要覆盖N期或C期地区,

  • 序列长度。


    合成和纯化中*关键的因素之一是长度过长。例如,在IMMUNOSTEP中,我们推荐用作抗原的肽不*过10-15个氨基酸,因为它们将是理想的,因为它们维持天然蛋白质中线性表位的结构。

  • 疏水区域。


    疏水性显着影响肽的溶解度; 在这个意义上,我们的经验使我们能够通过根据其亲水性和/或疏水性特征调整不同氨基酸的频率来增加肽的溶解度。诸如色氨酸,亮氨酸,缬氨酸,甲硫氨酸,苯丙氨酸,异亮氨酸的高发生率肽可能不溶于水溶液中,并且这使得我们能够保持这些疏水氨基酸的比例低于50%,同时确保存在至少一个带电氨基酸每五个残基。在生理pH下,精氨酸,谷氨酰胺,天冬氨酸和赖氨酸在他们的侧链被充电。一个简单的改变或消除N端或C端末端的一些极性残基可能会影响正性或负性溶解度。

  • 有问题的氨基酸:


    半胱氨酸,甲硫氨酸和色氨酸易于在其侧链上氧化,因此含有一定百分比的肽可能难以获得高纯度。由于我们在多肽合成方面的经验,我们能够防止此类氧化并保证高纯度肽。

  • 二级结构。


    在肽合成过程中,β片层的形成可能会影响肽的溶剂化和有序合成,造成其不同区域的损失。通过推荐消除缬氨酸,异亮氨酸,酪氨酸,苯丙氨酸,色氨酸,亮氨酸,谷氨酰胺或苏氨酸存在多个或相邻残基的区域,我们可以减少这些缺失的数量和合成中不需要的产物的出现。在大多数情况下,保守变化以及合成过程中采用的其他措施可以提高纯度和质量方面的成功几率。措施如插入甘氨酸或脯氨酸,每三个残基或谷氨酰胺取代天冬酰胺或苏氨酸取代丝氨酸。

 

肽修饰


我们经常发现我们的客户需要对已经开发的肽进行多种修饰。这些修改在不同的实验中很常见,并且需要习惯于处理它们的团队的经验。

  • D-氨基酸
  • 不寻常的氨基酸:Abu,Ahx,Aib,Aic,Cit,Dpr,hyp,Met(O),2-Nal,NIe,Orn,Pen ...
  • C-term修饰:酰胺化,lys(生物素),Lys(FAM)
  • N-term修饰:乙酰化,肉豆蔻酸,棕榈酸,甲酸,生物素。
  • N期荧光标记:FAM,FITC,TAMRA
  • Lys侧链修饰:Lys(AC),Lys(生物素)
  • 磷酸化。磷酸化-Ser,磷酸化-Thr,磷酸化-Tyr
  • 环化。**个二硫桥,**个二硫桥,头对尾环化
  • 结合。KLH BSA
  • 多抗原肽(MAP)4个分支,8个分支

 

我们该怎样帮助你?


IMMUNOSTEP在肽合成开发方面的经验一直是我们客户在其研究项目中取得成功的关键。这使我们能够提供多种肽合成和修饰产品。在我们近15年的经验中,我们设计并合成了多种多肽,这些多肽已被我们的客户几乎所有的工作领域使用,尤其是在研究领域。

 

服务

描述

1

用于膜运输研究的肽家族的合成。

设计和合成在已确定的系中转运HIV的肽家族。

细胞感染的体外研究。

2

用于开发抗体的多肽合成(多克隆和单克隆)。

设计,合成,修饰和偶联载体蛋白,以利用可用作开发抗体的靶点的序列,这两种抗体在不同物种(兔,鸡,小鼠......)和单克隆(小鼠)中都是多克隆的。

3

用于体内研究的肽合成。

用于动物模型体内研究的肽的设计和合成,鼠类,用于发展神经退行性疾病。

4

用于开发诊断试剂盒(IVD)的肽的设计和合成。

用于研究具有重大社会影响的疾病的肽的开发 - 腹腔疾病研究 - 谷蛋白中的免疫原性序列。

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