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IL-6细胞@ATCC@IL-6细胞
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IL-6细胞@ATCC@IL-6细胞 一、细胞的冻存:为避免污染造成的损失,*小化连续细胞系的 遗传改变和避免有限细胞系的老化和转化,需要冻存哺乳细胞。冻存细胞前,细胞应该特性化并检查 是否污染。

有几种普通培养基用来冻存细胞。对于包含有血清的培养基,成分可能如下:

◆包含10%甘油的完全培养基,

◆包含10%二甲基亚砜(DMSO)的完全培养基,

◆50% 细胞条件培养基和50%含有10%甘油的新鲜培养基,或

◆50% 细胞条件培养基和50%含有10%二甲基亚砜的新鲜培养基。

对于无血清培养基,一些普通的培养基成分可能是:

◆50% 细胞条件无血清培养基和50%包含有7.5%二甲基亚砜的新鲜的无血清培养基,或

◆包含有7.5%二甲基亚砜和10%细胞培养级BSA的新鲜无血清培养基。


IL-6细胞@ATCC@IL-6细胞@肿瘤细胞

肿瘤细胞培养技术要点 1、取材:材料主要来源于外科手术或活检瘤组织,取材时避免用坏死 组织,要挑选瘤细胞集中和活力较好的部位,瘤性转移淋巴结或胸腹水是较好的培养材料。取材后尽 快培养,因故不能立即培养者,可冻存。其培养方法及冻存方法同前述正常组织。

2、成纤维细胞排除:在肿瘤组织中常混杂有一些成纤维细胞,培养时能与瘤细胞同时生长, 并常压过癌细胞,导致癌细胞生长受阻以至消失,应仔细排除。排除方法常有:机械刮除法、反复贴 壁法、消化排除法、胶原酶消化法等。

3、提高肿瘤细胞培养存活率和生长率根据实验经验,肿瘤细胞在体外不易培养,建立能传代 的肿瘤细胞系更为困难。一般当肿瘤组成或细胞被原代培养后,要经过对新环境的适应才能生长,因 此不能局限于一般培养法,须采用一些特殊措施。如:用适宜底物,鼠尾胶原底层及饲细胞底层等。 用细胞生长因子,根据细胞种类不同选用不同的促细胞生长因子,如胰岛素、氢化可的松,雌激素等 。也可以考虑动物媒介培养。

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