产品概述
我们建议使用本产品的更新版本:MethylFlash Global DNA Methylation (5-mC) ELISA Easy Kit(比色法)
MethylFlash Methylated DNA 5-mC Quantification Kit (Colorimetric)是一整套优化的缓冲液和试剂,通过特异性测量类似 ELISA 的微孔板形式的 5-甲基胞嘧啶 (5-mC) 水平,对整体 DNA 甲基化进行比色定量。与基于 LUMA 或基于 LINE-1、Alu 和 LTR 的检测相比,MethylFlash™ 技术可直接定量实际的整体 DNA 甲基化。
该试剂盒还经过专门优化,可与 MethylFlash 羟甲基化 DNA 定量试剂盒(比色法)配合使用,同时定量甲基化 DNA 和羟甲基化 DNA。
产品特点
MethylFlash™ 甲基化 DNA 定量试剂盒(比色法)通过简化工作流程和提高结果的一致性,进一步改进了我们之前的 Methylamp™ 整体 DNA 甲基化定量试剂盒。它使用一种创/新方法使背景信号极低,从而消除了板的干燥和阻塞步骤。与基于色谱的方法(如 HPLC 或质谱法)相比,该产品提供了一种经济高效的方法来准确测量 5-甲基胞嘧啶的水平。该套件具有以下优点和特点:
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比色分析具有易于遵循的步骤,方便快捷。整个过程可以在 4 小时内完成。
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创/新的试剂盒组成使背景信号极低,无需板封闭,使检测简单、准确、可靠且一致。
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高灵敏度,其中检测限可低至 0.2 ng 的甲基化 DNA,可接受低至 50 ng 的起始基因组 DNA。
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优化的抗体和增强剂溶液对 5mC 具有高度特异性,在样品 DNA 的指定浓度范围内,与未甲基化胞嘧啶没有交叉反应性,与羟甲基胞嘧啶没有或可以忽略不计的交叉反应性。
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包括通用阳性和阴性对照,适用于定量任何物种的甲基化 DNA。
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联管孔板规格使分析更加灵活:手动或高通量分析。
原理和程序
MethylFlash™ 甲基化 DNA 定量试剂盒(比色法)包含了定量全球 DNA 甲基化所需的所有试剂。在该检测中,DNA 结合到剥离经过专门处理的孔中,这些孔具有高 DNA 亲和力。使用捕获和检测抗体检测 DNA 的甲基化部分,然后通过在微孔板分光光度计中读取 450 nm 处的吸光度,通过类似 ELISA 的反应进行定量。甲基化 DNA 的量与测得的 OD 强度成正比,这可以通过试剂盒中包含的两种不同 DNA 样品的相对甲基化状态公式或使用标准曲线对 5-甲基胞嘧啶 (5mC) 进行**定量来计算。
简单、快速、灵活
整个比色分析具有易于遵循的步骤,方便快捷,可在 4 小时内完成。条孔微孔板规格允许在手动或高通量分析中进行灵活的分析。该试剂盒包含通用阳性和阴性对照,用于定量来自任何物种(如哺乳动物、植物、真菌、细菌和病毒)的甲基化 DNA。
安/全方便
定量整体 DNA 甲基化所需的所有试剂,包括阴性对照和阳性对照,都方便地包装在试剂盒中。DNA 样品的直接比色定量取代了过时或劣质的方法,无需 DNA 消化/变性、放射性、提取或色谱分析。
高灵敏度和特异性
新颖的程序和专有的试剂盒组成能够以高灵敏度和特异性实现甲基化 DNA 的准确定量。起始 DNA 的检测限可低至 0.2 ng 的甲基化 DNA。
可用的基于 ELISA 的 Global DNA 甲基化检测方法的比较
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MethylFlash(比色)
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竞争对手 Z
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竞争对手 C
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检测原理
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直接 ELISA
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直接 ELISA
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间接 ELISA
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格式
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96 孔板
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96 孔板
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96 孔板
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敏感性
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出色的检测限:0.2 ng 5-mC DNA
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良好的检测限:>0.5 ng 的 5-mC DNA
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检测限极低:>1000 ng 5 mC DNA
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信噪比
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>20,背景非常低
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<4 具有高背景
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不适用*
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程序便利性
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无需 DNA 板封闭和变性
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需要板封闭和 DNA 变性
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需要在另一块板中进行板封闭、DNA 消化和抗体竞争性孵育
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协议时间
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<4 小时
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<4 小时
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>8 小时
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DNA 类型和种类
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适用于任何物种,包括 ssDNA 和 dsDNA
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**人和小鼠 ssDNA
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各种物种
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特 异性
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仅特定于 5 mC
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与 5-hmC 的交叉反应
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不适用*
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定量类型
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相对和**定量
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相对
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相对
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标准控制
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稳定,**量为 5 mC 即可定量,可普遍用于任何物种
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不稳定,不能定量,只能用于人或小鼠
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不适用*
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*/小输入量
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50 ng
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100 ng
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1000 ng
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检测准确性
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高、稳定和定量的标准品控制。经用户验证与 LC-MS 分析密切相关
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标准品控制不明确、不稳定且未定量
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不适用*
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% 5 mC 计算
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简单
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复杂
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未提供
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**方法
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是的
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不
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不
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人气
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非常高的已发表引文计数
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低发表引文计数
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低发表引文计数
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支持专业知识
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自 2006 年以来
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自 2013 年以来
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自 2011 年以来
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* 数据表提供的信息不足或产品无法提供数据以做出*/终决定