MM45T.Li细胞 细胞的常规观察
细胞接种或传代以后，实验者每天或至多间隔1～2d，要对细胞做常规性检查。观察细胞形态和生长情况以及培养的pH变化、有无污染等。根据细胞动态变化，做换液或传代处理，如发现异常情况应及时采取措施。一. 细胞复苏与培养
将液氮或- 80℃ 保存的肿瘤细胞于 37℃ 水浴，快速溶化，用 8.0ml 培养基混匀已融化的肿瘤细胞悬液，于 1500 转/ 分，离心 3 分钟。 弃上清，再吸取 8.0ml 培养基质混匀细胞沉淀，再 1500 转/ 分，离心 3 分钟，弃上清，细胞沉淀用 1.0ml 培养基混匀，备用。 另取一个 75cm2 方瓶，加入 14.0ml 培养基质，将上述制备的含 肿瘤细胞悬液(1.0ml)加入此方瓶中，于 37℃，5%CO2 孵育箱中培养。 若此肿瘤细胞悬浮生长，大约 3-4 天细胞基质会变黄，5.0ml 细胞悬液可传代一个方瓶培养，可用 3-4 个方瓶培养，一个方瓶中呈对数生长的肿瘤细胞可达 1-1.5×107 个，根据试验所需，可决定传代的次数。 若此肿瘤细胞呈贴壁生 长，经过 3-4 天，肿瘤细胞生长至 80%-95% 单层时，弃上清，用 0.5mM 的EDTA(难消化的肿瘤细胞用0.25%胰酶1.0ml)，处理肿瘤细胞大约 3-5 分钟，用倒置显微镜观察，当 90% 的肿瘤细胞变圆时，即可用弯管吹打并将消化的细胞转移到 15ml 离心管中，于 1500 转/ 分下，离心 3 分钟，弃上清，加少许培养基混匀，可传代 3 个 75cm2 方瓶扩大培养。
MM45T.Li细胞 细胞形态
生长状态良好的细胞http://www.shijichina.com/goodsid/fenleier/2909278/1.html，在一般显微镜下观察时可见，细胞透明度大、折光性强、轮廓不清。细胞生长**时，轮廓增强，胞质中常出现空泡、脂滴和其他颗粒状物，细胞之间空隙加大，细胞形态可变得不规则甚至失去原有特点，如上皮细胞变成类上皮细胞等VX2细胞某些染料当细胞死亡时能透过变性的胞膜与解体的细胞核DNA结合，而令其着色。因而常用台盼蓝(trypan blue) 鉴别细胞死活，活细胞不着色，死细胞核呈蓝色。二. 细胞冻存
将对数生长的肿瘤细胞用 1 个 75cm2 方瓶按上述方法收集，于 1500 转/分离心 3 分钟，弃上清，用保种液( 含 10% DMSO 的小牛血清)3.0ml 混匀，分别加入到 2-3 只保种管中，写上肿瘤细胞名称、时间、保种者姓名，放- 80℃ 保存，次日将它们转移到液氮中保存( 注： -80℃ 下可保存细胞半年至一年，液氮可保存细 胞 5-10 年，甚至更长的时间)。以上所有物品均需经过高温灭菌 ( 121℃，30 分钟) ，培养基质则经过过滤(0.22uM)除菌，所有操作均必须遵守无菌操作技术，避免细菌、真菌、病原体、衣原体等污染。
MM45T.Li细胞 注意事项：
1、严格无菌操作.操作间隔应让无菌操作台运转10分钟以上后，再进行下一个细胞株之操作;无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如试管架、吸管吸取器或吸管盒等可以暂时放置，其它实验用品用完即应移出，以利于气流之流通。实验用品以70%ethanol擦拭后才带入无菌操作台内。MM45T.Li细胞，拜力生物常年供应，量大从优。订购专线：021-33779008。实验操作应在抬面之中央无菌区域，勿在边缘之非无菌区域操作
2、*初接种的培养瓶应尽量小些，而接种的细胞数应尽量多些。
3、细胞在体外进行培养,失去了机体的调节和控制,因此,除满足营养的要求外,还必须使细胞生存环境昼接近活体的环境.外环境的培养条件如温度、渗透压、酸碱度等均能影响细胞的生长.
MM45T.Li细胞 更多产品信息:
A101-1辅酶ⅠNAD(H)含量试剂盒高效液相色谱法50管/48样
A101-2辅酶ⅠNAD(H)含量试剂盒可见分光光度法50管/48样
A304NAD激酶(NADK)试剂盒可见分光光度法50管/48样
A402乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒可见分光光度法50管/24样
A406苹果酸脱氢酶(MDH)试剂盒紫外分光光度法50管/48样
A501NADH-CoQ还原酶测试盒 紫外分光光度法50管/48样
A503NADH氧化酶(NOX)测试盒 可见分光光度法50管/48样
B101-1辅酶ⅡNADP(H)含量试剂盒高效液相色谱法50管/48样
B101-2辅酶ⅡNADP(H)含量试剂盒可见分光光度法50管/48样
B201NAD激酶(NADK)试剂盒可见分光光度法50管/48样
B301NADP磷酸酶(NADPase)测试盒可见分光光度法50管/48样
B4016-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6PDH)试剂盒紫外分光光度法50管/48样
B402胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)试剂盒紫外分光光度法50管/48样
B403苹果酸酶(ME)试剂盒紫外分光光度法50管/48样
