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简单介绍:
关键字:人血清淀粉样蛋白A检测试剂盒 免疫组化试剂盒 用于体外诊断。试剂盒用于检测与人体组织或细胞标本。人血清淀粉样蛋白A检测试剂盒 免疫组化试剂盒适用范围为冰冻切片和石蜡包埋组织切片,新准备好的淋巴细胞,和固定的培养细胞。人血清淀粉样蛋白A检测试剂盒在1987年 Zymed 公司引入Histostain?-SP 检测试剂盒。
详情介绍:
关键字:人血清淀粉样蛋白A检测试剂盒
免疫组化试剂盒 用于体外诊断。试剂盒用于检测与人体组织或细胞标本。人血清淀粉样蛋白A检测试剂盒
免疫组化试剂盒适用范围为冰冻切片和石蜡包埋组织切片,新准备好的淋巴细胞,和固定的培养细胞。人血清淀粉样蛋白A检测试剂盒在1987年 Zymed 公司引入Histostain?-SP 检测试剂盒。
LAB-SA (也叫做链亲和素-生物素放大体系)被公认为是免疫组化*好的监测方法。LAB-SA的方法学已经在基础研究和平常的试验中广泛应用。
关键字:人血清淀粉样蛋白A检测试剂盒
免疫组化试剂盒6大特点
 1.简易:以简单的一步反应取代常规法的五个步骤。
 2.快捷:以1个小时取代常规法的3-5 个小时。
 3.通用:适合于绝大多数**抗体,而且不需要二级抗体反应。
 4.灵敏:具有与常规法相似的灵敏度。
 5.重现性好:实验结果重现性好。 
 6.经济:抗体和试剂可重复使用 4-5次。
一、实验原理与意义 
免疫组织化学又称免疫细胞化学,是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通
过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新
技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来,借助显微镜(包括荧
光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用,在细胞、亚细胞水平检测各种抗原物质(如蛋
白质、多肽、酶、激素、病原体以及受体等)。 
二、实验器材 
微波炉、吹风机、组化笔、湿盒、烤箱、振荡器、染缸、光学显微镜、纯木浆卫生纸、
计时器和通风橱等。
关键字:人血清淀粉样蛋白A检测试剂盒
注意事项 
1.    苏木素复染时间需要摸索,尤其阳性染色也在细胞核上。 
2.    DAB 显色时间需要达到*优化,镜下观察达到阳性染色明显但背景不太深。 
3.    抗体孵育时间和抗体浓度需要摸索。尤其一抗孵育*好在 4 度过夜。 
4.    切片脱蜡和水化要充分;加反应液时要覆盖组织充分;每次加液前甩干洗涤液,但
又防止干片;用组化笔画圈时尽量画大一点,否则墨水排斥液体,引起片周边干片。 
5.    片子着色不均匀的原因如下: 
①  脱蜡不充分。可以 60 ℃烤 20 min,立即放入新鲜的 xylene1; 
②  水化不全。应经常配制新鲜的梯度乙醇; 
③  抗体没混匀。用移液器充分混匀一抗/二抗等试剂; 
④  抗体孵育时,切片放倾斜; 
⑤  抗体孵育后 PBS 冲洗不充分。 
⑥  制片厚薄不均匀等问题。染片盒不平,切片倾斜。 
6.    一抗从 4 ℃拿出后,为什么有人说要 37 度复温,目的是什么? 
①  一方面,防止切片从 4 ℃直接放入 PBS 易脱片; ②  另一方面,使抗原抗体结合更稳定。一般不需要,但对表达较弱的抗原可能有
用,4 ℃和 37 ℃度时分子运动方式不同,前者分子碰撞机率和运动速度小于后者,后
者结合更快,但敏感性也提高了并易造成非特异染色。 
关键字:人血清淀粉样蛋白A检测试剂盒 
免疫组化步骤:
①石蜡涂片脱蜡和水化后, 用PBS (PH714) 冲洗3 次,每次3min。
②根据每一种抗体的要求,
对组织抗原进行相应的修
③每张涂片加50ul3 %过氧化氢溶液, 室温下孵育10min , 以阻断内源性过氧化物酶的活性。PBS 冲洗3 次, 每次3min。
④每张涂片根椐需要加50ul 的**抗体( 如CD20 , CD3 , CD45RO , CD45RB ,TdT, MPO , CD5 , CD79 , CD56 , CD79a ,CD43 , CD5 , CD10 ) , 室温下孵育60min。
⑤除去PBS 液, 每张涂片加50ul 聚合物( Polymer Enhancer) , 室温下孵育20min , PBS 冲洗3 次, 每次3min。
⑥除去PBS 液, 每张涂片加50ul酶标抗鼠/ 兔聚合物(Polymerized HRP -Anti Ms/ Rb IgG) , 室温下孵育30min。PBS 冲洗3 次, 每次3min。
⑦除去PBS液, 每张涂片加50ul 新鲜配制的DAB或AEC 溶液, 显微镜下观察3~10min。
⑧自来水冲洗, 苏木紫复染, 011 %盐酸分化, 自来水冲洗, PBS 返蓝。
⑨涂片经过梯度酒精脱水干燥, 用DAE 显色, 中性树胶封固。
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关键字:人血清淀粉样蛋白A检测试剂盒
细胞冻存和复苏实验原理:细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以*大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质能提高细胞膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。复苏细胞应采用快速融化的方法,这样可以保证细胞外结晶在很短的时间内即融化,避免由于缓慢融化使水分渗入细胞内形成胞内再结晶对细胞造成损伤。
  X细胞细胞冻存和复苏实验注意事项:
  1. 从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存,但*好为对数生长期细胞。在冻存前***好换一次培养液。
  2. 将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作,以免**。
  3. 冻存和复苏*好用新配制的培养液。
关键字:人血清淀粉样蛋白A检测试剂盒冻存和复苏的原则:慢冻快融
  当细胞冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升高,并在细胞内形成冰晶。
  如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶就大,大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重结晶。
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